О белках-предателях
увидеть комментарии (0)
04.12.2018
РИА Новости | «Ученые из США открыли две молекулы, подавляющие "спящий" ВИЧ» | https://ria.ru/20181203/1540664898.html |
МОСКВА, 3 дек РИА Новости. Американские молекулярные биологи выяснили, как работают особые "белки-предатели", помогающие ВИЧ быстро "воскрешать себя" после прекращения приема лекарств, и открыли вещества, блокирующие их действие. Результаты первых опытов были раскрыты в журнале Antimicrobial Agents and Chemotherapy.
Окопная война
Сегодня больные ВИЧ могут прожить десятки лет благодаря приему антиретровирусных препаратов веществ, подавляющих различные этапы репликации вируса в клетках тела. Так как они часто обладают сильными побочными эффектами, больные вынуждены прекращать их прием на несколько недель.
При прекращении их приема ВИЧ "вылезает из окопов" и начинает интенсивно копировать себя, зачастую возвращаясь к начальным масштабам инфекции за три или две недели. В последние годы ученые активно пытаются найти лекарства или антитела, которые помогали бы избежать подобной "контратаки" вируса, или позволяли бы "выгнать" вирус из клеток.
Относительно недавно биологи выяснили, что вирус "окапывается" не только в Т-клетках, которые он обычно заражает, но и в так называемых макрофагах амебообразных клетках, уничтожающих бактерий, токсичные частицы и различный "мусор". Это открытие заставило ученых приступить к масштабным поискам других "бункеров" ВИЧ и методов выкуривания вируса из них.
Эти поиски, как объясняет Варгас, осложняются тем, что клетки человека содержат в себе несколько сотен генов, которые ВИЧ может использовать для того, чтобы следить за уровнем активности иммунитета и наличием антиретровирусных препаратов в крови его жертвы.
Эти участки ДНК отвечают за сборку особых сигнальных молекул и ферментов, так называемых киназ, многие из которых играют критически важную роль в работе организма. По этой причине удаление самых важных из них может закончиться смертью человека, что не позволяло ученым найти "простое" решение для этой проблемы.
Варгас и его коллеги предлагают радикально другой метод ведения "окопной войны". Для победы над ВИЧ не обязательно полностью уничтожить вирус или лишить его помощи со стороны "белков-предателей". Можно просто изменить работу этих киназ таким образом, что он никогда больше не "проснется".
Массированная атака на ВИЧ
Руководствуясь этой идеей, молекулярные биологи проверили, как четыре сотни уже открытых молекул, разрушающих или подавляющих эти белки, будут действовать на иммунные клетки, внутри которых прячется особая версия ВИЧ.
Геном этого вируса был модифицирован таким образом, что зараженные ими иммунные тельца начинали вырабатывать и выбрасывать в питательную среду светящиеся молекулы, не встречающиеся в обычных человеческих клетках. Соответственно, "пробуждение" ВИЧ и заражение новых клеток приводило к росту концентрации этого вещества, а подавление инфекции к падению его доли.
Подобный прием, как отмечает Варгас, позволил его команде быстро перебрать все 416 потенциальных лекарств, и обнаружить, что сразу четыре из них мешали ВИЧ выйти из спячки при любой комбинации сигналов, обычно вызывающих реактивацию вируса.
Два из них, PF-3758309 и данусериб, при этом не мешали работе других компонентов клетки и отличались крайне высокой эффективностью работы. Как показали дальнейшие опыты, даже небольшие дозы этих веществ повторно "усыпили" вирус в клетках нескольких добровольцев, зараженных "нормальным" ВИЧ.
Эти лекарства, как отмечают ученые, действуют на разные типы киназ. PF-3758309 подавляет белок PAK4, связанный с работой "скелета" клеток, а данусериб фермент Aurora B, управляющий процессом их деления. И то, и другое вещество уже были одобрены регулирующими органами в качестве лекарств от рака костного мозга и опухолей различных внутренних желез.
Дальнейшее изучение подавляемых ими белков, соответственно, поможет понять, как именно их использует ВИЧ, а сами препараты в ближайшее время начнут проходить клинические испытания. Особые надежды ученые возлагают на PF-3758309, обладающий рекордно высокой силой действия на зараженные клетки.
************************
Source: Inhibitors of Signaling Pathways that Block Reversal of HIV-1 Latency | «Inhibitors of Signaling Pathways that Block Reversal of HIV-1 Latency» | https://aac.asm.org/content/early/2018/11/13/AAC.01744-18 |
<... Signaling pathways play a key role in HIV-1 latency. In this study, we used the 24ST1NLESG cell line of HIV-1 latency to screen a library of structurally diverse, medicinally active, cell permeable kinase inhibitors, which target a wide range of signaling pathways, to identify inhibitors of HIV-1 latency reversal. The screen was carried-out in the absence or presence of three mechanistically distinct latency reversing agents (LRAs), namely prostratin, panobinostat and JQ-1. We identified inhibitors that only blocked the activity of a specific LRA, as well as inhibitors that blocked the activity of all LRAs. For example, we identified 12 inhibitors targeted toward protein kinase C or downstream kinases that blocked the activity of prostratin. We also identified 12 kinase inhibitors that blocked reversal of HIV-1 latency irrespective of the LRA used in the screen. Of these danusertib, an Aurora kinase inhibitor, and PF-3758309, a PAK4 inhibitor, were the most potent. The 50% inhibitory concentrations in the 24ST1NLESG cells ranged from 40-147 nM for danusertib (selectivity indices >150) and from 0.1-1nM for PF-3758309 (selectivity indices >3,300). Both danusertib and PF-3758309 inhibited latency reversal in CD4+ T cells isolated from HIV-1-infected donors. Collectively, our study describes a chemical approach that can be applied to elucidate the role of signaling pathways involved in LRA activity, or the maintenance of HIV-1 latency; and also identifies inhibitors of latent HIV-1 reactivation that could be used with antiretroviral therapy to reduce residual viremia. ...>
назад